रिलैक्सजीन ब्लड डीएनए सिस्टम (0.1-20ml)
विशेषताएं
लचीला नमूना प्रारंभिक राशि: 2-400 μg उच्च शुद्धता डीएनए विभिन्न रक्त नमूनों के 0.1-20 मिलीलीटर से निकाला जा सकता है।
सुरक्षित और विश्वसनीय: फिनोल/क्लोरोफॉर्म जैसे कार्बनिक सॉल्वैंट्स का कोई संदूषण नहीं।
अनुप्रयोग
विभिन्न नियमित अनुप्रयोगों के लिए उपयुक्त, जैसे प्रतिबंध पाचन, पीसीआर, पुस्तकालय निर्माण, दक्षिणी धब्बा (उच्च-थ्रूपुट अनुक्रमण का चिप संकरण), आदि।
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रिलैक्सजीन ब्लड डीएनए सिस्टम का उपयोग करते हुए ईडीटीए के साथ ३०० μl, ५ मिलीलीटर और १० मिलीलीटर मानव थक्कारोधी रक्त से जीनोमिक डीएनए की शुद्धि। क्रमशः 200 μl, 500 μl और 1 मिलीलीटर eluates के 3 μl प्रति लेन लोड किए गए थे। एम: तियानजेन मार्कर D15000। प्रायोगिक परिणाम: 0.1-20 मिलीलीटर रक्त रिलैक्सजीन ब्लड डीएनए सिस्टम द्वारा अच्छी लीनियर रेंज के साथ निकाला जा सकता है। |
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अन्य आपूर्तिकर्ताओं से रिलेक्सजीन ब्लड डीएनए सिस्टम और इसी तरह के उत्पादों का उपयोग करते हुए ईडीटीए के साथ ३०० μl मानव थक्कारोधी से निकाले गए जीनोमिक डीएनए की तुलना। एम: तियानजेन मार्कर D15000। 200 μl eluates के 3 μl प्रति लेन लोड किए गए थे। प्रायोगिक परिणाम: अन्य आपूर्तिकर्ताओं की तुलना में, रिलैक्सजीन ब्लड डीएनए सिस्टम रक्त जीडीएनए की उच्च उपज, शुद्धता और अभिन्नता प्राप्त कर सकता है। |
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रिलैक्सजीन ब्लड डीएनए सिस्टम का उपयोग करके रक्त के नमूनों से जीनोमिक डीएनए निकाला गया। नमूने: EDTA, EDTA/NaF, हेपरिन और सोडियम साइट्रेट के साथ ३०० μl मानव थक्कारोधी रक्त; 2 मिलीलीटर रक्त से बफी कोट; 10 μl चिकन रक्त और 200 μl चूहे का खून। 200 μl eluates के 3 μl प्रति लेन लोड किए गए थे। एम: तियांगन मार्कर D15000। प्रायोगिक परिणाम: रिलैक्सजीन ब्लड डीएनए सिस्टम को विभिन्न उपचारों के साथ-साथ विभिन्न प्रजातियों के रक्त के साथ मानव थक्कारोधी के उच्च गुणवत्ता वाले डीएनए शुद्धिकरण में व्यापक रूप से लागू किया जा सकता है। |
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अन्य संदर्भ डेटा |
ए-1 प्रारंभिक नमूने में कोशिकाओं या वायरस की कम सांद्रता - कोशिकाओं या वायरस की एकाग्रता को समृद्ध करें।
A-2 नमूनों का अपर्याप्त विश्लेषण —नमूने को lysis बफर के साथ अच्छी तरह से नहीं मिलाया गया है। इसे 1-2 बार पल्स-वोर्टेक्सिंग द्वारा अच्छी तरह मिलाने का सुझाव दिया जाता है। - प्रोटीनएज़ के की गतिविधि में कमी के कारण अपर्याप्त सेल लसीका - अपर्याप्त गर्म स्नान समय के कारण अपर्याप्त सेल लसीस या प्रोटीन का क्षरण। यह सुझाव दिया जाता है कि ऊतक को छोटे टुकड़ों में काट लें और स्नान के समय को बढ़ाकर लाइसेट में सभी अवशेषों को हटा दें।
A-3 अपर्याप्त डीएनए सोखना। - स्पिन कॉलम में लाइसेट को स्थानांतरित करने से पहले 100% इथेनॉल के बजाय कोई इथेनॉल या कम प्रतिशत नहीं जोड़ा गया था।
ए-4 रेफरेंस बफर का पीएच मान बहुत कम है। -पीएच को 8.0-8.3 के बीच समायोजित करें।
एलुएंट में अवशिष्ट इथेनॉल।
- एलुएंट में अवशिष्ट धुलाई बफर पीडब्लू है। इथेनॉल को 3-5 मिनट के लिए स्पिन कॉलम को सेंट्रीफ्यूज करके और फिर 1-2 मिनट के लिए कमरे के तापमान या 50 ℃ इनक्यूबेटर पर रखकर हटाया जा सकता है।
ए-1 नमूना ताजा नहीं है। -एक सकारात्मक नमूना डीएनए को नियंत्रण के रूप में यह निर्धारित करने के लिए निकालें कि नमूने में डीएनए खराब हो गया है या नहीं।
ए-2 अनुचित पूर्व उपचार। - अत्यधिक तरल नाइट्रोजन पीसने, नमी वापस आने, या नमूने की बहुत बड़ी मात्रा के कारण।
विभिन्न नमूनों के लिए प्रीट्रीटमेंट अलग-अलग होना चाहिए। पौधों के नमूनों के लिए, तरल नाइट्रोजन में अच्छी तरह से पीसना सुनिश्चित करें। जानवरों के नमूनों के लिए, तरल नाइट्रोजन में समरूप या अच्छी तरह से पीस लें। सेल की दीवारों के नमूनों के लिए जिन्हें तोड़ना मुश्किल है, जैसे कि जी + बैक्टीरिया और खमीर, सेल की दीवारों को तोड़ने के लिए लाइसोजाइम, लाइटिकेज या यांत्रिक तरीकों का उपयोग करने का सुझाव दिया जाता है।
४९९२२०१/४९९२२०२ प्लांट जीनोमिक डीएनए किट एक स्तंभ-आधारित पद्धति को अपनाता है जिसमें निष्कर्षण के लिए क्लोरोफॉर्म की आवश्यकता होती है। यह विशेष रूप से विभिन्न पौधों के नमूनों के साथ-साथ पौधे के सूखे पाउडर के लिए उपयुक्त है। हाई-डीएनएसिक्योर प्लांट किट भी कॉलम-आधारित है, लेकिन इसमें फिनोल/क्लोरोफॉर्म निष्कर्षण की कोई आवश्यकता नहीं है, जो इसे सुरक्षित और गैर-विषाक्त बनाता है। यह उच्च पॉलीसेकेराइड और पॉलीफेनोल सामग्री वाले पौधों के लिए उपयुक्त है। ४९९२७०९/४९९२७१० डीएनएक्विक प्लांट सिस्टम एक तरल-आधारित पद्धति को अपनाता है। फिनोल/क्लोरोफॉर्म निष्कर्षण की भी आवश्यकता नहीं है। शुद्धिकरण प्रक्रिया सरल और तेज़ है, जिसमें नमूना प्रारंभ मात्रा की कोई सीमा नहीं है, इसलिए उपयोगकर्ता प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुसार राशि को लचीले ढंग से समायोजित कर सकते हैं। उच्च उपज के साथ बड़े आकार के जीडीएनए अंश प्राप्त किए जा सकते हैं।
जीनोमिक डीएनए को TIANamp ब्लड डीएनए किट द्वारा मानव पूरे रक्त के नमूनों के विभिन्न संस्करणों से निकाला गया था। परिणाम इस प्रकार हैं। परिणाम केवल संदर्भ के रूप में सूचीबद्ध हैं, वास्तविक निष्कर्षण परिणाम नमूनों की स्थितियों पर निर्भर करता है।
रक्त के थक्के डीएनए निष्कर्षण के लिए प्रोटोकॉल को विशिष्ट निर्देश में बदलकर इन दो किटों में प्रदान किए गए अभिकर्मकों का उपयोग करके रक्त का थक्का डीएनए निष्कर्षण किया जा सकता है। अनुरोध करने पर रक्त के थक्के डीएनए निष्कर्षण प्रोटोकॉल की सॉफ्ट कॉपी जारी की जा सकती है।
1 मिलीलीटर पीबीएस, सामान्य खारा या टीई बफर के साथ ताजा नमूना निलंबित करें। पूरी तरह से एक homogenizer द्वारा नमूना homogenize और एक ट्यूब के नीचे से केंद्रापसारक द्वारा अवक्षेप इकट्ठा । सतह पर तैरनेवाला निपटाने, और 200 μl बफर जीए के साथ वेग को फिर से निलंबित करें। निर्देश के अनुसार निम्नलिखित डीएनए शुद्धिकरण किया जा सकता है।
प्लाज्मा, सीरम और शरीर के तरल पदार्थों के नमूनों में जीडीएनए की शुद्धि के लिए, TIANamp माइक्रो डीएनए किट की सिफारिश की जाती है। सीरम/प्लाज्मा नमूनों से वायरस जीडीएनए की शुद्धि के लिए, टियांम्प वायरस डीएनए/आरएनए किट की सिफारिश की जाती है। सीरम और प्लाज्मा नमूनों से जीवाणु जीडीएनए की शुद्धि के लिए, TIANamp बैक्टीरिया डीएनए किट की सिफारिश की जाती है (सकारात्मक बैक्टीरिया के लिए लाइसोजाइम को शामिल किया जाना चाहिए)। लार के नमूनों के लिए, हाय-स्वैब डीएनए किट और तियानैम्प बैक्टीरिया डीएनए किट की सिफारिश की जाती है।
फंगल जीनोम निष्कर्षण के लिए डीएनएसिक्योर प्लांट किट या डीएनएक्विक प्लांट सिस्टम की सिफारिश की जाती है। यीस्ट जीनोम निष्कर्षण के लिए, TIANamp यीस्ट डीएनए किट की सिफारिश की जाती है (लाइटिकेज को स्वयं तैयार किया जाना चाहिए)।
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